支原体检测试剂盒

在细胞培养中，良好的实验规范和定期检测支原体污染也十分必要。支原体检测的方法有很多种，如直接培养、DNA 荧光染色、ELISA和PCR法等。本产品主要采用PCR方法对各种生物材料（如细胞培养物、实验动物分泌物、动物血清等）支原体感染的检测。通过PCR方法检测培养细胞等生物材料中的支原体，所用引物为根据支原体16S-23S rRNA序列保守区域设计，只特异性扩增支原体 DNA，检出灵敏度与特异性均较高。PCR扩增及电泳分析只需数个小时，操作方便简单。

产品成分

使用说明

(请详细阅读使用说明后再开始相关实验)

1.待测细胞连续传代3次或培养至两周；

2.细胞达到80% confluency或以上的时候，取1ml上清，进行低速离心（300g，5min，4℃）；

3.离心结束后取950μl上清液，转移至新的无菌EP管中，以去除培养基中的细胞；

4.将上清液高速离心（12000g，10min，4℃），离心结束后，去除900μl上清，剩余50ul用以重悬沉淀（可能肉眼不可见）；

5.将重悬好的沉淀放置4度冰箱，作为PCR的模板备用；

根据下表，配制PCR反应液

注：为防止Positive Control Template 污染，请将实验组和阴性对照组加完以后，最后再将C液加入阳性对照组

6.PCR程序   

7.制备DNA gel：称取一定量Argrose粉末，用1X TAE buffer配制成1.5%的DNA GEL；

8.待PCR反应结束后，取8-10μl的PCR 反应液（无需要加 loading buffer）直接进行1.5%琼脂糖凝胶电泳，确认PCR扩增产物；

9.目的条带为518bp。示例如下：

推荐使用频率