原理
多元醇在较长时间低温条件下羟基可结合蛋白，在样本去除细胞碎片和其余不溶蛋白的前提下，多元醇可将可溶蛋白和外泌体一同离心沉淀。同创正业在原有多元醇沉淀剂的基础之上，优化了试剂配方使原来需要4℃沉淀过夜提高到只需4℃沉淀1-2小时即可达到外泌体沉淀完全。
鉴定
检测外泌体经典方法为电镜、NTA和Western Blot，但由于样本材料的不同，沉淀法提取外泌体会有不同的可溶蛋白共沉淀，所以以上三种方法不适合反映沉淀法提取外泌体的质量。我们引入了外泌体中MicroRNA（MiR）定量检测来判定沉淀法提取外泌体的多少。
MiR qPCR试剂盒：
miRcute增强型miRNA cDNA第一链合成试剂盒 KR211 （天根生物）
miRcute增强型miRNA荧光定量检测试剂盒(SYBR Green)FP411（天根生物）
荧光定量PCR仪： ABI7500
MiR 靶标： let-7a
逆转录产物Let-7a倍比稀释（100-106 拷贝/微升）qPCR结果
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竞争优势
优化了多元醇试剂配方使原来需要4℃沉淀过夜提高到只需4℃沉淀1-2小时即可达到外泌体完全沉淀。
