产品原理
亲和层析捕获法是基于多孔材料与磷脂酰丝氨酸(PS)的可逆结合洗脱,乐赛生物采用与外泌体高亲和力的大孔径材料的纯化方式。样品在结合缓冲液(EV-SB)的作用下外泌体特异的吸附在多孔材料的表面,而其他非磷脂蛋白质等杂质则不被吸附而去除。吸附了外泌体的多孔材料经洗液洗涤去除蛋白质和杂质,最后,纯化的外泌体被洗脱液EB洗脱。
产品特性
►目前市场上尚未见同类亲和纯化产品
►特有的PS可逆结合材料包裹多孔材料(专利)
►比表面积:120M2/g
►密度:0.95g/cm3
►粒径:45μm
►回收得率:≥90%
鉴定
1.电镜鉴定

2.CSFE染色后FACS检测

产品竞争优势
采用45μm大孔径微球包裹磷脂酰丝氨酸(PS)特异性结合材料,推出了外泌体固相纯化试剂盒,1g亲和纯化填料至少可结合500mL样本的外泌体,纯化得率可达90%以上,洗脱后外泌体纯度高,无螯合剂等试剂掺入,对后续实验影响较小。
竞争性产品
目前市场上大体积外泌体纯化的策略主要有两种:
1.采用切向流方式超滤,通过不同孔径的膜来浓缩样本外泌体,由于是物理过滤,所以只要是大于孔径的蛋白和其他可溶物都会被浓缩下来,会造成外泌体不纯,切向流也会对外泌体有机械剪切损伤,导致外泌体回收率会降低。
2.排阻色谱柱方式,排阻色谱树脂柱类似于分子筛的原理,大粒径的分子或者囊泡会先流出,小粒径的分子和囊泡会进入树脂球延迟而后流出,通过粒径的截流来分离合适大小的外泌体,因为外泌体不是一种粒径,是不同粒径的混合物,排阻色谱柱会损失一部分外泌体,同时相同粒径的分子和可溶物也会被收集,由于不是亲和结合,所以没有浓缩的功能,最终液体样本纯化后体积变化不大,达不到浓缩的目的。
厂牌 | PlusExoTM | 某知名国产品 |
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货号 | E04-20 | E05-2 | E06-1 | RK05870 | RK05871 |
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提取方法 | 亲和层析 | 粒径排阻+超滤浓缩 |
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样本体积(毫升) | 22.5*20=450 | 225*2=450 | 450 | 1*4=4 | 3*3=9 | 每次提取样本体积*提取次数 |
是否需要另购超滤管 | 否 | 否 | 否 | 是 | 是 |
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目录价格(元) | 4500 | 4280 | 3800 | 3360 | 5640 | 未计超滤管价格 |
提取1毫升样本的平均价格(元) | 10 | 9.51 | 8.44 | 840 | 626.67 | 未计超滤管价格 |
每次提取大约需要工作时间(分钟) | 30(22.5) | 50(225) | 90(450) | 60(1) | 60(3) | 括号中为一次提取的样本量(毫升) |
折算成从每毫升样本中提取外泌体所需时间(分钟) | 1.33 | 0.22 | 0.2 | 60 | 20 |
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是否需要使用荧光检测和离心机等仪器 | 否 | 否 | 否 | 是 | 是 |
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保证的外泌体纯化后浓度 | 10^6~10^8 | 10^6~10^8 | 10^6~10^8 | 未说明 | 未说明 |
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外泌体是否受到剪切力破坏 | 否 | 否 | 否 | 可能 | 可能 | 切向流超滤导致 |